Экономичная по времени и затратам система для получения белка в высоких количествах в клетках млекопитающих

Большинство белков для исследований в области структурной биологии получают путем экспрессии в высоких количествах в Escherichia coli. Однако экспрессионные системы на основе прокариот не обеспечивают получение многих белков в правильно свернутой и функциональной форме; поэтому были разработаны различные экспрессионные системы на основе эукариот. В настоящее время для структурных биологов предпочтительными экспрессионными системами являются дрожжи и клетки насекомых, инфицированные бакуловирусом. В данной работе представлены протоколы простого, быстрого и доступного метода транзиентной экспрессии белка в клетках млекопитающих. Результаты показывают, что этот метод сочетает несколько характеристик, необходимых для получения образцов, пригодных для структурно-биологических исследований, особенно для рентгеновской кристаллографии белков, а именно высокий выход белка, простую очистку, включение селено-метионина и контроль N-связанного гликозилирования. Система пригодна для использования в обычных лабораториях и может быть внедрена в процессы со средней или высокой пропускной способностью.