Газофазный тест разворачивания быстро предсказывает соотношения структура–функция в сконструированных антителах с регулируемой гибкостью

Человеческие (h)IgG2 моноклональные антитела (мАб) являются мощными агонистами отчасти благодаря способности подвергаться перемещению дисульфидных связей в области шарнира. В настоящей работе мы описываем быстрый, чувствительный метод столкновительно-индуцированного разворачивания (collision-induced unfolding, CIU), который демонстрирует предсказательную связь между газофазным разворачиванием белка и агонистической активностью в вариантах hIgG2. Кроме того, наши результаты подчеркивают важность инженерии шарнира для настройки соотношений структура–функция мАб при разработке будущих биотерапевтических средств. Агонистическая активность антител IgG2 частично зависит от гибкости их шарнирной области, измерение которой в полных антителах занимает много времени. Авторы разработали быстрый метод масс-спектрометрии, позволяющий оценивать эту гибкость и предсказывать агонистическую активность сконструированных вариантов антител.