Разработка и характеристика фибринового гидрогеля, обогащённого хитозаном, для регенерации пульпы зуба человека

Цель: Регенерация функциональной пульпы зуба в канале после пульпэктомии недавно была предложена в качестве нового терапевтического подхода в стоматологии. Для достижения этой цели необходим подходящий каркас, способный предотвращать рост остаточных эндодонтических бактерий и одновременно поддерживать новообразование тканей пульпы зуба. Целью настоящего исследования было создание инновационного клеточно-содержащего фибринового гидрогеля с добавлением хитозана для придания ему антибактериальных свойств. Методы: Сначала несколько составов фибрин–хитозан были исследованы методом реологического анализа, после чего наиболее подходящий для клинического применения состав изучали с точки зрения микроструктуры (с помощью сканирующей электронной микроскопии), антимикробной активности (анализ роста Enterococcus faecalis), жизнеспособности и распластывания мезенхимальных стволовых/стромальных клеток пульпы зуба (DP-MSC) после 7 суток культивирования (тест Live/Dead®), ультраструктуры DP-MSC и отложения внеклеточного матрикса (трансмиссионная электронная микроскопия), а также пролиферации DP-MSC и продукции коллагена (ОТ-ПЦР в реальном времени и иммуногистохимия). Результаты: Было установлено, что состав, включающий 10 мг/мл фибриногена и 0,5% (мас./мас.) хитозана со средней молярной массой и степенью ацетилирования 40%, подходит для формирования фибрин–хитозанового гидрогеля при цитосовместимом pH (примерно 7,2). Сравнительный анализ гидрогелей на основе только фибрина и фибрин–хитозановых гидрогелей выявил выраженный антибактериальный эффект хитозана, включённого в фибриновую сеть, а также сходные жизнеспособность DP-MSC, фибробластоподобную морфологию, скорость пролиферации и способность к продукции коллагена типов I/III. Значимость: Полученные результаты показывают, что включение хитозана в фибриновый гидрогель может способствовать новообразованию тканей пульпы зуба человека благодаря антибактериальному действию хитозана и отсутствию его значимого неблагоприятного влияния на морфологию, жизнеспособность и пролиферацию клеток пульпы зуба, а также продукцию коллагенового матрикса.