Потребление аминокислот в наивных и рекомбинантных культурах клеток CHO — продуцентах моноклонального антитела

Большинство коммерческих сред для культивирования клеток млекопитающих разработано для удовлетворения потребностей клеток в аминокислотах, необходимых для роста, но не обязательно для продукции рекомбинантного белка. В настоящем исследовании мы анализируем характер потребления аминокислот в наивных и рекомбинантных культурах клеток яичника китайского хомячка (CHO). В качестве рекомбинантной модели была выбрана клеточная линия CHO-S, генетически модифицированная для продукции моноклонального антитела. Мы приводим профили концентраций клеток, продукта и аминокислот в наивных и рекомбинантных культурах клеток, выращиваемых в среде CD OptiCHO™ с аминокислотной добавкой CHO CD EfficientFeed™ B или без нее. Мы количественно оцениваем и обсуждаем потребности в аминокислотах, обусловленные ростом клеток и продукцией рекомбинантного белка, в ходе длительного культивирования в режиме fed-batch. Мы подтвердили, что группа из пяти аминокислот, составляющих наибольшую массовую долю продукта, характеризуется наиболее высокой скоростью истощения и может стать лимитирующей для экспрессии продукта. В наших экспериментах аланин, не являющийся значимым массовым компонентом продукта, активно потреблялся в процессе продукции рекомбинантного белка. Оценка удельных потребностей в аминокислотах может оказать существенную помощь при разработке стратегий подпитки и внесения добавок для культур рекомбинантных клеток млекопитающих.