Оптимизация метода одиночной пластины с последовательными разведениями и нанесением капель (SP-SDS) с реперной точкой образца как надежного способа подсчёта КОЕ бактерий и дрожжей и выделения одиночных колоний из различных образцов

Предложен простой метод для оценки количества колониеобразующих единиц (КОЕ) бактерий и дрожжей в различных образцах без предварительных сведений о жизнеспособности, обозначенный как single plate-serial dilution spotting (SP-SDS) с основной рекомендацией использования реперной точки образца (100-ый запас). Для чистых культур последовательные разведения приготовляли от запаса с оптической плотностью 0.1 (100) и 20 μl аликвоты шести разведений (10^1–10^6) наносили в виде 10–15 микро-капель в шести секторах на агаризированной среде в 9-см планшетах. Для жидких образцов использовались разведения 10^0–10^5, а для коллоидных суспензий и твердых образцов (10% мас./об.) — разведения 10^1–10^6. После инкубации по крайней мере на одном уровне разведения получали 6–60 КОЕ на сектор, сопоставимо со стандартным методом с использованием 100 μl образца. Испытанный на различных бактериях, композитных образцах и Saccharomyces cerevisiae, SP-SDS продемонстрировал более широкую применимость по сравнению с альтернативными методами, такими как drop-plating и track-dilution, для оценки КОЕ, выделения одиночных колоний и проверки чистоты культур, что особенно подходит для условий с ограниченными ресурсами.