Применение флуоресцентного зондирования для разработки специфической химически мутагенной реакции для определения противоэпилептического препарата топирамата

Во многих экспериментальных приложениях флуоресцентные зонды (флюорофоры или флуоры) вытеснили традиционные методы благодаря своей адаптивности, чувствительности и возможности количественного определения. Целевой аналит топирамат не содержит флюорогенных или хромофорных групп; поэтому он не флуоресцирует в нативном состоянии и не поглощает в ультрафиолетовой области, что делает прямой анализ невозможным и требует химической модификации его молекулярной структуры. Этого можно достичь посредством флуоресцентного зондирования или метки реактивом-таггером. Вследствие этого предлагаемая аналитическая методика основана на развитии флуоресцентного зонда путём реакции с нингидрином с образованием конденсированного флуоресцентного производного, которое отслеживают флуориметрически. Конечный продукт измеряли при длине эмиссии λem 482 нм после возбуждения при λex 381 нм. В подходящем буферном растворе первичная аминосвязь топирамата может конденсироваться с нингидрином (β-дикетоном) и фенилацетальдегидом. Представлена новая, экологичная, реализуемая и селективная флуорометрическая стратегия для определения топирамата. Метод демонстрирует линейность в диапазоне концентраций 0,5–8 μg mL−1. Оценена квантовая выходность метода, а параметры валидации были изучены в соответствии с руководящими принципами International Council for Harmonisation (ICH). Наконец, предложенный зонд успешно применён для анализа топирамата в порошке и доступной лекарственной форме с высокой точностью, при этом существенного влияния вспомогательных веществ не обнаружено. Результаты показывают хорошее согласие с референтным методом, без значительных различий в точности и прецизионности.