Получение и свойства холестеролоксидазы из Nocardia sp. и ее применение для ферментативного определения общего холестерина в сыворотке

В работе представлены характеристика, выделение и очистка холестерол:кислород-оксидоредуктазы (КФ 1.1.3.6) из Nocardia sp. Этот фермент катализирует окисление холестерина до Δ4-холестенона с образованием перекиси водорода. Фермент отличается высокой стабильностью, проявляет активность в широком диапазоне pH и имеет Km 1,4 × 10−5 моль/л. Он обладает высокой специфичностью к Δ4- или Δ5-3β-гидроксихолестанам и может применяться для определения общего холестерина в сыворотке. В описанной методике перекись водорода измеряют по реакции с четырехвалентным титаном и ксиленоловым оранжевым. Это одностадийный ферментативный метод со стабильными реагентами, не требующий осаждения белков и не подверженный интерференции со стороны гемоглобина или билирубина.