Молекулярная характеристика лектина Trichinella spiralis и его участие во внедрении личинок в эпителиальные клетки кишечника хозяина

Целью настоящего исследования было изучение молекулярных характеристик лектина Trichinella spiralis (Tsgal) и взаимодействия между Tsgal и эпителиальными клетками кишечника хозяина (IEC). Функциональный домен Tsgal был клонирован и экспрессирован в системе Escherichia coli. Tsgal имел 97,1% идентичности с лектином T. nativa и 20,8% идентичности с галектином-8 человека. Анализ консервативных доменов показал, что Tsgal относится к галектинам тандемно-повторного типа (TR) и содержит два домена распознавания углеводов. Рекомбинантный Tsgal (rTsgal) с молекулярной массой 29,1 кДа распознавался сыворотками мышей, инфицированных T. spiralis, на 42-е сутки после заражения (dpi). Транскрипция гена Tsgal и экспрессия белка выявлялись соответственно методом полимеразной цепной реакции с обратной транскрипцией (ОТ-ПЦР) и иммуноблоттингом по Вестерну на всех стадиях развития T. spiralis, включая кишечные инвазионные личинки, взрослых червей, новорождённых личинок и мышечных личинок. Результаты непрямой иммунофлуоресценции (IFA) показали, что Tsgal преимущественно локализован в кутикуле и стихозомах личинок T. spiralis — мышечных личинок (ML), кишечных инвазионных личинок (IIL) и новорождённых личинок (NBL). rTsgal обладал гемагглютинирующей активностью в отношении эритроцитов человека, кролика и мыши. Фар-вестерн-блоттинг и конфокальная микроскопия продемонстрировали специфическое связывание между rTsgal и IEC; связывание локализовалось в мембране и цитоплазме IEC. Из четырёх исследованных сахаров — сахарозы, глюкозы, лактозы и мальтозы — только лактоза ингибировала агглютинацию эритроцитов человека группы B, индуцированную rTsgal. Кроме того, rTsgal способствовал внедрению личинок в IEC, тогда как сыворотка против rTsgal ингибировала это внедрение. Полученные результаты свидетельствуют о том, что Tsgal может участвовать во внедрении T. spiralis в кишечный эпителий на ранней стадии инфекции.