Локализация белка APECED в различных ядерных структурах

Аутоиммунная полиэндокринопатия — кандидоз — эктодермальная дистрофия (APECED) — единственное известное на сегодняшний день системное аутоиммунное заболевание с моногенной основой, для которого не выявлено ассоциации с областью главного комплекса гистосовместимости. Недавно мы выделили ген, дефектный при этом синдроме, и охарактеризовали несколько различных мутаций у пациентов с данным заболеванием. Новый ген AIRE содержит предполагаемый двухкомпонентный сигнал ядерной локализации, что указывает на ядерную локализацию соответствующего белка. Наличие в аминокислотной последовательности белка APECED двух цинк-пальцевых доменов PHD-типа, а также недавно описанного предполагаемого ДНК-связывающего домена SAND позволяет предположить его участие в регуляции экспрессии генов. Используя транзиторную экспрессию кДНК AIRE в клетках млекопитающих, мы продемонстрировали ядерную локализацию белка APECED. Иммуногистохимическое окрашивание трансфицированных клеток показало, что большая часть рекомбинантного белка APECED массой 58 кДа присутствует в виде ядерных точек. С помощью двойной иммунофлуоресцентной метки мы дополнительно показали, что эти структуры, содержащие APECED, и ранее описанные ядерные тельца PML в значительной степени не перекрываются. Белок AIRE также был визуализирован в различных тканях человека: в тимусе, селезёнке и лимфатических узлах у части клеток наблюдалось ядерное окрашивание антисывороткой против APECED. Иммунофлуоресцентное мечение мононуклеарных лейкоцитов периферической крови также выявило характерный для ядерных телец тип окрашивания у части этих клеток. Эти данные, полученные в системах in vitro и ex vivo, вместе с предполагаемыми структурными особенностями белка APECED позволяют предположить, что данный белок, вероятнее всего, участвует в регуляции экспрессии генов.