Последствия созревания и оплодотворения ооцитов крупного рогатого скота и раннего развития эмбрионов in vitro по сравнению с in vivo: значение для выхода и качества бластоцист

Целью данного исследования было изучить влияние созревания, оплодотворения и культивирования ооцитов крупного рогатого скота in vivo или in vitro на долю ооцитов, достигающих стадии бластоцисты, а также на качество бластоцист, оцениваемое по выживаемости после витрификации. В эксперименте 1 использовали 4 группы ооцитов: (1) незрелые ооциты из фолликулов размером 2–6 мм; (2) незрелые ооциты из фолликулов размером > 6 мм; (3) незрелые ооциты, полученные in vivo непосредственно перед выбросом лютеинизирующего гормона (LH); и (4) ооциты, созревшие in vivo. Из ооцитов, созревших in vivo, развивалось значительно больше бластоцист, чем из ооцитов, полученных непосредственно перед выбросом LH, или из ооцитов фолликулов размером 2–6 мм. Результаты для ооцитов из фолликулов размером > 6 мм были промежуточными. Все бластоцисты имели низкую выживаемость после витрификации. В эксперименте 2 ооциты, созревшие in vivo, либо (1) оплодотворяли in vitro, либо (2) оплодотворяли in vivo методом искусственного осеменения, после чего полученные предположительные зиготы извлекали на 1-е сутки. Затем обе группы культивировали in vitro. Выход бластоцист из ооцитов, оплодотворённых in vivo, был значительно выше, чем из ооцитов, оплодотворённых in vitro. Качество бластоцист в группах было сходным. В обеих группах выживаемость после витрификации была низкой. В эксперименте 3a предположительные зиготы, полученные после созревания in vitro (IVM) и оплодотворения in vitro (IVF), культивировали либо in vitro в синтетической яйцеводной жидкости, либо in vivo в яйцеводе овцы. В эксперименте 3b зиготы, созревшие in vivo и оплодотворённые in vivo, либо хирургически извлекали на 1-е сутки и культивировали in vitro в синтетической яйцеводной жидкости, либо извлекали нехирургическим методом на 7-е сутки. Между группами зигот, происходивших из одного источника (оплодотворение in vivo или in vitro), не выявлено различий по выходу бластоцист независимо от того, проходило ли культивирование in vivo или in vitro. Однако качество бластоцист существенно зависело от условий культивирования: бластоцисты, полученные после культивирования in vivo, выживали после витрификации значительно чаще, чем их аналоги, культивированные in vitro. В совокупности...