О-специфичная полисахаридлиаза из шипового белка фага LKA1 снижает вирулентность Pseudomonas

Фаг Pseudomonas LKA1, относящийся к подсемейству Autographivirinae, кодирует шиповой белок (LKA1gp49), который связывает и расщепляет липополисахарид (ЛПС) B-полосы (О-специфический антиген, OSA) Pseudomonas aeruginosa PAO1. Кристаллическая структура каталитического домена LKA1gp49 включает бета-спираль, вставочный домен и С-концевой домен, подобный дискоидиновому. Предполагаемый сайт связывания и процессинга субстрата расположен на поверхности бета-спирали, тогда как С-концевой домен, вероятно, участвует в связывании углеводов. Анализ фрагментов деградированного ЛПС (OSA) методами спектроскопии ядерного магнитного резонанса (ЯМР) и масс-спектрометрии выявил специфичность полисахаридлиазы к серотипу O5. LKA1gp49 снижает вирулентность in vivo в модели инфекции Galleria mellonella и повышает чувствительность P. aeruginosa к активности комплемента сыворотки. Этот фермент вызывает деградацию биопленки и не влияет на активность ципрофлоксацина и гентамицина. Это первое всестороннее исследование ЛПС-деградирующей лиазы, происходящей из фага Pseudomonas. Биологические свойства фермента указывают на перспективность его применения при разработке антимикробных средств, а также в качестве микробиологического или биотехнологического инструмента.