Оценка антительного ответа против нуклеокапсидного или спайкового белка коронавируса SARS методом иммуноблоттинга или ИФА

Коронавирус тяжёлого острого респираторного синдрома (SARS) (SARS-CoV) — недавно возникший вирус, вызывающий SARS с высокой летальностью среди инфицированных лиц. Для изучения гуморального ответа против SARS-CoV мы оценивали в сыворотке пациентов антитела, специфичные к нуклеокапсидному (N) и спайковому (S) белкам, методом иммуноблоттинга и иммуноферментного анализа (ИФА). Рекомбинантные белки N и S SARS-CoV очищали из трансформированных клеток E. coli. Образцы сыворотки 40 пациентов, инфицированных SARS-CoV, в период реконвалесценции анализировали методом иммуноблоттинга с использованием очищенных антигенов. Серийные образцы сыворотки 12 пациентов с SARS, диагноз у которых был подтверждён методом обратной транскрипционно-полимеразной цепной реакции (ОТ-ПЦР), исследовали методом ИФА, используя рекомбинантный белок N в качестве сорбированного антигена. По данным иммуноблоттинга, антитела, специфичные к белку N, выявлялись у 97,5% пациентов с SARS, тогда как антитела, специфичные к белку S, — лишь у 47,5% образцов. При использовании ИФА на основе белка N антитела, специфичные к белку N, выявлялись у 10 из 12 пациентов; у 6 из них сероконверсия происходила в среднем через 16 дней после начала лихорадки. Иммуноблоттинг оказался полезным для выявления гуморального иммунного ответа после инфицирования SARS-CoV. Антитела к белку N SARS-CoV появляются на ранней стадии инфекции; поэтому ИФА на основе белка N может служить простым, чувствительным и специфичным тестом для диагностики инфекции SARS-CoV.