Влияние оплодотворения in vitro на экспрессию генов и развитие преимплантационных эмбрионов мыши

Культивирование преимплантационных эмбрионов мыши in vitro (IVC) связано с изменениями экспрессии генов. Однако неизвестно, влияет ли метод оплодотворения на глобальный профиль экспрессии генов. Мы сравнили экспрессию генов и развитие бластоцист мыши, полученных после оплодотворения in vitro (IVF), бластоцист, оплодотворённых in vivo и культивированных in vitro начиная со стадии зиготы (IVC), а также контрольных бластоцист, вымытых из матки на 3,5-е сутки после спаривания. Глобальный профиль экспрессии генов оценивали с использованием чипа Affymetrix 430 2.0. Оказалось, что каждому методу оплодотворения соответствуют уникальные профиль экспрессии генов и особенности развития. В эмбрионах, культивированных in vitro, наблюдалось уменьшение числа трофобластических клеток (33,5 клетки в группе IVF, 39,9 клетки в группе IVC и 49,6 клетки в группе in vivo) и, в меньшей степени, клеток внутренней клеточной массы (соответственно 12,8, 11,7 и 13,8). Ядра клеток внутренней клеточной массы после культивирования in vitro были крупнее (соответственно 140 мкм², 113 мкм² и 86 мкм²). Хотя в когорте IVF по сравнению с контрольными эмбрионами in vivo статистически значимо различалась экспрессия большого числа генов (1 912), величина изменений экспрессии была небольшой, и более чем в четыре раза изменялась экспрессия лишь у небольшой части генов (29 генов). Неожиданно эмбрионы IVF отличались от эмбрионов IVC (статистически значимо различалась экспрессия 3 058 генов, но более чем в четыре раза изменялась экспрессия только трёх генов). После IVC наиболее часто изменялись пути, связанные с пролиферацией, апоптозом и морфогенезом. В целом IVF и культивирование эмбрионов оказывали выраженное влияние на профиль экспрессии генов и фенотип преимплантационных эмбрионов мыши.