Точная синтез ДНК через 8-оксоаденин у человеческого PrimPol

PrimPol — человеческая ДНК-примаза и ДНК-полимераза, участвующая в толерантности к повреждениям ДНК как в ядре, так и в митохондриях. PrimPol восстанавливает работу остановившихся репликационных вилок, синтезируя ДНК-праймеры де-ново, а также обладает активностью транслеза ДНК (TLS). PrimPol эффективно и относительно точно обходит несколько повреждений ДНК, включая 8-оксогуанин, тиминовый гликоль и 5-формилурацил. В этой работе мы показали, что PrimPol обладает эффективной и точной TLS-активностью при синтезе через 8-оксоаденин, ещё одно распространённое повреждение ДНК, вызываемое окислительным стрессом. Точность PrimPol на матрице с 8-oxoA была существенно выше по сравнению с ДНК, содержащей 8-oxoG. Замена ионов Mg2+ на Mn2+ стимулировала активность PrimPol на ДНК с 8-oxoA и 8-oxoG, а также на немодифицированном аденине (A) в зависимости от последовательности посредством механизма пропуска повреждения (или сжатия матрицы — template scrunching). В совокупности наши данные поддерживают идею о том, что PrimPol обладает эффективной TLS-активностью в отношении широкого спектра повреждений ДНК, вызванных окислительным стрессом.