Преимущества MabSelect VH3 — новой VH3-специфичной смолы на основе белка A — перед двумя традиционными аналогами при очистке триспецифического антитела на основе VHH

Введение: Аффинная хроматография на белке A является наиболее широко используемым методом первичного захвата продукта при очистке антител. Лиганды коммерческих смол на основе белка A от разных или даже одних и тех же поставщиков могут обладать различной специфичностью связывания. Например, MabSelect SuRe LX и MabSelect PrismA связываются соответственно с кристаллизуемым фрагментом (Fc) антитела и одновременно с кристаллизуемым фрагментом и участками вариабельной тяжелой цепи 3 (VH3), тогда как недавно представленная смола на основе белка A MabSelect VH3 связывается исключительно с участком VH3. Цель: Целью исследования было сравнить способность трех смол на основе белка A — MabSelect SuRe LX, MabSelect PrismA и MabSelect VH3 — удалять побочные продукты, связанные с триспецифическим антителом (TsAb) на основе антитела, состоящего только из вариабельных доменов тяжелой цепи. Методы: Осветленный культуральный сбор, содержащий TsAb, отдельно обрабатывали на колонках MabSelect SuRe LX, MabSelect PrismA и MabSelect VH3. Для каждой колонки разделение побочных продуктов контролировали путем анализа соответствующих фракций элюата с использованием электрофореза в полиакриламидном геле с додецилсульфатом натрия и эксклюзионной хроматографии в сочетании с высокоэффективной жидкостной хроматографией. Результаты: MabSelect VH3 продемонстрировала более высокую эффективность удаления побочных продуктов по сравнению с двумя другими смолами на основе белка A. Заключение: MabSelect VH3 особенно подходит для очистки биспецифических антител и TsAb, в которых продукт и побочные продукты содержат различное число доменов VH3. При очистке мультиспецифических антител рекомендуется проводить скрининг различных аффинных смол с различной специфичностью связывания, поскольку это может помочь определить наиболее эффективный вариант для разделения.