Система для секвенирования ДНК методом случайных фрагментов

С использованием синтетической ДНК в ген ген β-галактозидазы (β-D-галактозидгалактогидролазы, EC 3.21.23) одноцепочечного ДНК-фага M13mp2 (Gronenborn, B. and Messing, J. (1978) Nature 272, 375–377) был введён универсальный сайт клонирования. Этот сайт добавляет 14 кодонов и не влияет на способность продукта lac-гена к внутрицистронной комплементации. Два сайта расщепления рестрикционными эндонуклеазами в вирусном гене II были удалены с помощью мутаций одной пары оснований. С использованием нового фага M13mp7 фрагменты ДНК, образованные при расщеплении различными рестрикционными эндонуклеазами, можно непосредственно клонировать. Нуклеотидные последовательности клонированных ДНК можно быстро определить методом синтеза ДНК с использованием терминаторов цепи и синтетического олигонуклеотидного праймера, комплементарного 15 основаниям, предшествующим новой совокупности сайтов рестрикции.