Иммунопозитивные к c-kit интерстициальные клетки типа Кахаля в миометрии человека

Предыдущие сообщения об интерстициальных клетках, похожих на клетки Кахаля, в матке человека противоречивы в отношении иммунореактивности к c-kit: либо отрицательны (но положительны по виментину) в беременном миометрии, либо положительны, предположительно, в эндометрии. Целью настоящего исследования было верифицировать существование миометриальных клеток, похожих на клетки Кахаля (m-CLIC). Были использованы шесть различных дополняющих друг друга подходов: (1) наджизненное окрашивание метиленовым синим образцов ткани (криосрезы); (2) наджизненное окрашивание метиленовым синим и Janus green B (m-CLIC и маркеры митохондрий соответственно); (3) внеклеточные одноклеточные электрофизиологические регистрации в культурах клеток; (4) неконвенциональная световая микроскопия на полутонких срезах (<1 µm), фиксированных глутаральдегидом/осмием и встраиваемых в Epon, окрашенных толуидиновым синим (TSM); (5) трансмиссная электронная микроскопия (TEM); и (6) иммуннофлуоресценция (IF). Мы обнаружили m-CLIC в миометрии на криосрезах и в клеточных культурах. In vitro m-CLIC составляли примерно 7% от общего количества клеток. m-CLIC имели 2–3 характерных отростка, которые были очень длинными (≈60 µm), очень тонкими (≤0.5 µm) и монодиформными. Расширенные участки отростков обычно содержали митохондрии. In vitro m-CLIC проявляли спонтанную электрическую активность (мембранные потенциалы 62.4 ± 7.22 mV, короткая длительность 1.197 ± 0.04 ms). Кроме того, m-CLIC соответствовали общепринятым критериям TEM, так называемым «золотым» или «платиновым» стандартам (например, наличие прерывистой базальной ламины, кавеол, эндоплазматического ретикула и плотных контактов между собой, с миоцитами, нервными волокнами и/или капиллярами). IF показала, что m-CLIC экспрессируют CD117/c-kit, иногда в ассоциации с CD34, а вдоль их отростков обнаруживается виментин. В заключение, мы описываем миометриальные интерстициальные клетки, похожие на клетки Кахаля, которые имеют аффинитет к наджизненным красителям метиленовому синему и Janus green B, соответствуют всем критериям TEM, экспрессируют CD117/c-kit и демонстрируют спонтанную электрическую активность.