Независимая от 53BP1 антагонистическая функция Shieldin в отношении BRCA1 при репликационно-связанных двухцепочечных разрывах

Опухоли с дефицитом BRCA1 гиперчувствительны к ингибиторам PARP (PARPi) из‑за нарушенной гомологичной рекомбинации (HR). Комплекс 53BP1–Shieldin ингибирует рестрикцию концов при репликационно-независимых двухцепочечных разрывах ДНК (DSB), способствуя чувствительности к PARPi в клетках с дефектом BRCA1. Его роль при репликационно-связанных DSB менее ясна. В настоящей работе мы показываем, что потеря Shld2 или Shld3, но не 53bp1, обеспечивает устойчивость к PARPi в эмбриональных стволовых клетках мыши, лишённых функционального BRCT-домена BRCA1. В отличие от потери 53bp1, делеций Shld2 или Shld3 частично восстанавливает HR при репликационно-связанных DSB, уменьшает сигнатуры вставок/делеций, ассоциированные с BRCA1, и способствует загрузке RAD51. Эта 53BP1-независимая функция требует комплекса CST и противодействует остаточной активности коил-коил домена BRCA1 в загрузке RAD51. Потеря Shld2 также обеспечивает устойчивость к PARPi в клетках с нулевой экспрессией Bard1, сохраняющих остаточный BRCA1, но не в клетках, экспрессирующих BRCA1 без RING-домена при деградации BARD1. Эти результаты выявляют 53BP1-независимую функцию Shieldin в поддержании дефицита HR в клетках с дефектом BRCA1 и дают новые механистические представления о резистентности к PARPi. Известно, что путь 53BP1–Shieldin влияет на резистентность к ингибиторам PARP в опухолях с дефицитом BRCA1 через изменение репарации ДНК; здесь показано, что белки Shieldin независимо от 53BP1 сохраняют специфические дефекты репарации ДНК, и их потеря восстанавливает репарацию и ведёт к резистентности к ингибиторам PARP.