Оплодотворение in vitro и развитие эмбрионов in vitro и in vivo у тигра (Panthera tigris)

Проведено исследование с целью оценить применимость к тигру системы оплодотворения in vitro и культивирования эмбрионов, ранее разработанной для домашней кошки. В опыте I (июль 1989 г.) 10 самок тигра получили 2 500 (n = 5) или 5 000 (n = 5) МЕ eCG внутримышечно, а через 84 ч — 2 000 МЕ hCG внутримышечно. В опыте II (январь 1990 г.) 6 самкам, 5 из которых участвовали в опыте I, вводили 2 500 МЕ eCG внутримышечно, а через 84 ч — 2 000 МЕ hCG внутримышечно. Через 24–26 ч после введения hCG всем тиграм выполняли лапароскопию, а ооциты аспирировали трансабдоминально. По развитию фолликулов (диаметр фолликулов ≥2 мм) все самки ответили на введение экзогенных гонадотропинов; число фолликулов составляло от 6 до 52 на самку. Число фолликулов и эффективность извлечения ооцитов не зависели (p > 0,05) от дозы eCG или времени года. Всего из 468 фолликулов было получено 456 ооцитов (97,4%; в среднем 28,5 +/- 3,4 ооцита на самку). Из них 378 (82,9%) были признаны зрелыми, 48 (10,5%) — незрелыми, а 30 (6,6%) — дегенеративными. В опыте I у 7 самцов тигра было получено 8 эякулятов методом электроэякуляции, а в опыте II у 3 самцов были получены 3 образца спермы. Подвижные сперматозоиды были получены во всех случаях; средний объем эякулята составил 7,5 +/- 0,7 мл, число подвижных сперматозоидов в эякуляте — 105,9 +/- 20,6 x 10(6), а доля структурно нормальных сперматозоидов — 81,4 +/- 2,0%. После обработки методом swim-up 0,05 x 10(6) подвижных сперматозоидов совместно культивировали с 10 или менее ооцитами тигра во влажной атмосфере при 38 градусах C, содержащей 5% CO2 в воздухе. Из 358 оплодотворенных зрелых ооцитов оплодотворение произошло у 227 (63,4%). Ооциты двух самок были контаминированы в культуре и поэтому исключены из расчетов дробления эмбрионов. Из оставшихся 195 оплодотворенных ооцитов 187 (95,9%) достигли стадии двух клеток. Партеногенетического дробления в неосемененных контрольных ооцитах (n = 20) не наблюдалось. Восемьдесят шесть эмбрионов хорошего или отличного качества...