Транслокация активных митохондрий в процессе созревания ооцитов, оплодотворения и раннего развития эмбрионов свиньи in vitro

Распределение активных митохондрий в процессе созревания ооцитов, оплодотворения и раннего развития эмбрионов свиньи in vitro исследовали с использованием окрашивания MitoTracker Green и конфокальной лазерной сканирующей микроскопии. Также изучали регуляцию транслокации митохондрий микрофиламентами и микротрубочками. В ооцитах, полученных из мелких фолликулов, сильное окрашивание активных митохондрий наблюдалось в кортикальном слое цитоплазмы. Для полностью выросших ооцитов, полученных из крупных фолликулов, была характерна аккумуляция активных митохондрий в периферической цитоплазме и вокруг зародышевых пузырьков. В процессе мейотического созревания — от разрушения зародышевого пузырька (GVBD) до анафазы I — митохондрии накапливались в перинуклеарной области. В зрелых ооцитах формировались более крупные митохондриальные фокусы, которые перемещались во внутреннюю цитоплазму. В отличие от ооцитов, созревших in vivo, у которых крупные митохондриальные фокусы распределялись по всей цитоплазме, в большинстве ооцитов, созревших in vitro, митохондрии не обнаруживались в центральной цитоплазме. В первых полярных тельцах ооцитов, находящихся на стадии метафазы II, наблюдалось сильное окрашивание митохондрий. В оплодотворённых яйцеклетках активные митохондрии агрегировали в области пронуклеусов. Перинуклеарная кластеризация и кортикальное кольцо были наиболее выраженными особенностями раннего дробления. В бластоцистах активные митохондрии распределялись как в клетках внутренней клеточной массы, так и в клетках трофэктодермы. Разборка микротрубочек с помощью нокодазола подавляла как агрегацию митохондрий в области зародышевого пузырька и их направленное перемещение во внутреннюю цитоплазму при созревании ооцитов, так и транслокацию митохондрий в перипронуклеарную область при оплодотворении, тогда как разрушение микрофиламентов цитохалазином B не оказывало эффекта. Эти данные указывают на то, что: (i) созревание ооцитов, оплодотворение и раннее развитие эмбрионов у свиней сопровождаются изменениями распределения активных митохондрий; (ii) транслокация митохондрий опосредуется микротрубочками, но...