Влияние кислой pH на экспрессию поверхностно ассоциированных белков Streptococcus oralis

Streptococcus oralis, представитель митис-группы оральных стрептококков, участвует в патогенезе инфекционного эндокардита и является преобладающим кислотоустойчивым немутантным стрептококком в зубном налете. Мы поставили цель идентифицировать наиболее обильные поверхностно ассоциированные белки S. oralis и исследовать изменения в их экспрессии при выращивании микроорганизма в кислых культуральных условиях. Поверхностно ассоциированные белки извлекали из клеток, выращенных в пакетной культуре, разделяли методом двумерного гель-электрофореза, вырезали, переваривали трипсином и анализировали методом матрично-активируемой лазерной десорбции/ионизации с времемерной масс-спектрометрией (MALDI-TOF) и жидкостной хроматографии с тандемной масс-спектрометрией (LC-MS/MS). Предполагаемые функции присваивались по гомологии с транслированной геномной базой данных Streptococcus pneumoniae. Было идентифицировано в общей сложности 27 белков; среди них липопротеин, фактор рекомбинации рибосомы и гликолитические ферменты фосфоглицераткиназа, фруктозо-1,6-бисфосфат-альдолаза, глицеральдегид-3-фосфатдегидрогеназа и энолаза. Наиболее обильным белком был фосфаркерамический белок HPr, представленный тремя изоформами. Ни лактатдегидрогеназа, ни пировинограддегидрогеназа/пировиноград-оксидаза, доминирующие внутриклеточные белки, не выявлены среди белков на гелях, что демонстрирует, что белки в поверхностно ассоциированном пуле не образовались в результате лизиса клеток. Одиннадцать из идентифицированных белков демонстрировали различную экспрессию при выращивании клеток при pH 5.2 по сравнению с pH 7.0; среди них супероксиддисмутаза, гомолог ди-пептидазы V из Lactococcus lactis и факторы удлинения трансляции белка G, Tu и Ts. Данное исследование расширяет набор стрептококковых белков, известных как экспрессируемые на поверхности клетки. Требуются дальнейшие исследования для уточнения их функций в этой внеклеточной локализации и определения того, как их экспрессия зависит от других условий окружающей среды.