TPR-домен BubR1 поддерживает митотический контрольный пункт, способствуя формированию MCC и взаимодействию MCC с APC/C

BubR1 является ключевым компонентом митотического контрольного пункта — механизма контроля, обеспечивающего точное расхождение хромосом посредством облегчения сборки митотического контрольного комплекса (MCC) и стимуляции его связывания с анафаз-промотирующим комплексом/цизомом (APC/C). Хотя роль BubR1 в митотическом контрольном пункте изучена подробно, функция его N-концевого тетра-трико-пептидного повторного (TPR) домена остается плохо понятой. В настоящем исследовании мы устанавливаем существенную роль TPR-домена BubR1 в митотическом контрольном пункте. Опираясь на разрешенную структуру MCC–APC/C, полученную методом крио-ЭМ, мы идентифицируем и характеризуем несколько взаимодействий между TPR-доменом BubR1 и Mad2, Cdc20APC/C и Apc2. Мы также обнаруживаем внутримолекулярное взаимодействие между TPR-доменом и расположенными ниже остатками BubR1, которое, по-видимому, организует структуру, напоминающую «лассо», включающую четыре элемента связывания с Cdc20APC/C и тем самым усиливающую взаимодействие с Cdc20 в составе APC/C. Функциональные и биохимические анализы демонстрируют, что эти взаимодействия в совокупности способствуют сборке MCC и связыванию MCC с APC/C, обеспечивая быструю активацию контрольного пункта сборки веретена (SAC) в ответ на дефекты прикрепления микротрубочек к кинетохору. TPR-домен BubR1 играет ключевые роли в сигнальной передаче SAC через множественные взаимодействия с Mad2, Apc2, Cdc20A и самим BubR1, которые совместно способствуют сборке MCC и связыванию MCC с APC/C.