Характеристика референсных материалов рицина и агглютинина R. communis

Интоксикации Ricinus communis известны на протяжении столетий и связывались с токсичным белком рицином. Благодаря своей токсичности, доступности, простоте получения и отсутствию медицинских средств противодействия рицин привлек внимание как потенциальный агент биологического оружия. Несмотря на разработку различных технологий анализа рицина, общепризнанных «золотых стандартов» практически не существует. В настоящее время экспертные лаборатории используют полученные различными способами очищенные материалы собственного производства, что делает практически невозможным сопоставление точности и чувствительности различных методов. Технически сложной задачей является дифференциация рицина и агглютинина R. communis (RCA120) — менее токсичного, но высокогомологичного белка, также содержащегося в R. communis. В настоящей работе были получены высокоочищенные референсные материалы рицина и RCA120, которые были всесторонне охарактеризованы методами гель-электрофореза, жидкостной хроматографии с электроспрей-ионизацией и тандемной масс-спектрометрией (LC-ESI MS/MS), матрично-активированной лазерной десорбционной ионизацией с времяпролетным анализатором, а также иммунологическими и функциональными методами. Степень чистоты составила >97% для рицина и >99% для RCA120. Различные изоформы рицина и RCA120 были однозначно идентифицированы и дифференцированы методом LC-ESI MS/MS. Функциональный анализ с использованием теста цитотоксичности в реальном времени показал, что рицин примерно в 300 раз токсичнее RCA120. Высокоочищенные референсные материалы рицина и RCA120 были использованы для проведения международного теста квалификации лабораторий.