Ангиогенные свойства концентрированных факторов роста (CGF): роль растворимых факторов и клеточных компонентов

Концентрированные факторы роста (CGF), полученные из крови, представляют собой новый аутологичный биоматериал с перспективными применениями в регенеративной медицине. Ангиогенез является ключевым фактором регенерации тканей, однако роль CGF в формировании сосудов остается неясной. Целью данного исследования была характеристика ангиогенных свойств CGF путем оценки влияния их растворимых факторов и клеточных компонентов на неоваскуляризацию в модели ангиогенеза in vitro. Сгустки CGF культивировали в течение 14 дней в среде для культивирования клеток; после этого собирали кондиционированную среду CGF (CGF-CM), а растворимые факторы и клеточные компоненты разделяли и характеризовали. Растворимые факторы CGF, такие как факторы роста (VEGF и TGF-β1) и матриксные металлопротеиназы (MMP-2 и MMP-9), оценивали методом ИФА. Ангиогенные свойства растворимых факторов CGF анализировали путем стимуляции культивируемых эндотелиальных клеток человека возрастающими концентрациями (1%, 5%, 10% или 20%) CGF-CM; их влияние на миграцию клеток и формирование трубкоподобных структур оценивали с помощью теста на заживление раны и анализа Matrigel соответственно. Экспрессию эндотелиальных ангиогенных медиаторов определяли с использованием методов количественной ПЦР с обратной транскрипцией (qRT-PCR) и ИФА. Клетки, происходящие из CGF, характеризовали с помощью иммунного окрашивания, qRT-PCR и анализа Matrigel. Мы обнаружили, что CGF-CM, содержащая такие важные проангиогенные факторы, как VEGF, TGF-β1, MMP-9 и MMP-2, стимулировала миграцию эндотелиальных клеток, формирование трубчатых структур и экспрессию эндотелиальными клетками множества ангиогенных медиаторов, включая факторы роста, хемокины и металлопротеиназы. Кроме того, было установлено, что клетки, происходящие из CGF, обладали признаками эндотелиальных клеток-предшественников, поскольку экспрессировали стволовой маркер CD34 и эндотелиальные маркеры, а также участвовали в неоангиогенном процессе. В заключение, полученные результаты свидетельствуют о том, что CGF способны стимулировать эндотелиальный ангиогенез посредством своих растворимых и клеточных компонентов и могут использоваться в качестве биоматериала для терапевтического васкулогенеза в области регенерации тканей.