Два T7-подобных бактериофага, K5-2 и K5-4, каждый кодирует по две деполимеразы капсулы: выделение и функциональная характеристика

Были выделены и охарактеризованы два бактериофага Klebsiella — K5-2 и K5-4, способные инфицировать и размножаться на штаммах Klebsiella с капсульными типами K30/K69 и K5 либо K8 и K5 соответственно. Каждый фаг содержал две открытые рамки считывания (ORF), кодирующие две предполагаемые деполимеразы капсулы. Первая ORF кодировала белки хвостовых фибрилл, обладающие активностью деполимераз K30/K69 и K8. Вторая ORF кодировала гипотетические белки, практически идентичные по аминокислотной последовательности и обладающие активностью деполимеразы K5. Окрашивание альциановым синим обработанных ферментами капсульных полисахаридов (CPS) показало, что очищенные деполимеразы способны расщеплять очищенные CPS Klebsiella in vitro с высвобождением моносахаридов. Делеционные мутанты по капсуле K5 не лизировались ни одним из фагов, что указывает на необходимость капсулы для фаговой инфекции. Гибель бактерий наблюдалась при инкубации штаммов Klebsiella с фагами, но не с очищенными деполимеразами. Обработка фагом K5-4 значительно повышала выживаемость мышей, инфицированных штаммом K. pneumoniae K5. Таким образом, были охарактеризованы два Klebsiella-фаго с двойной специфичностью к хозяину и их хвостовые фибриллы, обладающие активностью деполимераз капсулы. Каждый фаг и кодируемая фагом деполимераза были специфичны к капсульному типу K30/K69, K8 или K5 и могли использоваться для типирования и лечения инфекций, вызываемых K. pneumoniae.