Метод острой и быстрой деградации эндогенных белков

Методы направленного нарушения функции белков произвели революцию в науке и значительно ускорили систематическую характеристику генов. В настоящее время для нарушения функции белков применяют два основных подхода: нокаут ДНК и РНК-интерференцию, действующие соответственно на уровне генома и матричной РНК (мРНК). Метод, непосредственно изменяющий уровни эндогенных белков, до сих пор отсутствует. Здесь мы представляем Trim-Away — метод острой деградации эндогенных белков в клетках млекопитающих без предварительной модификации генома или мРНК. Trim-Away задействует клеточный аппарат деградации белков для удаления немодифицированных нативных белков в течение нескольких минут после применения. Такая быстрота снижает риск компенсации фенотипов и накопления вторичных неспецифических нарушений со временем. Поскольку Trim-Away использует антитела, его можно применять к широкому спектру целевых белков с помощью готовых коммерческих реагентов. Trim-Away позволяет изучать функции белков в различных типах клеток, включая неделящиеся первичные клетки, в которых возможности методов, направленных на геном и РНК, ограничены.