Основные детерминанты связывания с рецептором и нейтрализации расположены в одном и том же домене шипового белка вируса трансмиссивного гастроэнтерита свиней (коронавируса)

Шиповой гликопротеин (S) коронавирусов, являющийся основной мишенью вируснейтрализующих антител, как предполагается, обеспечивает прикрепление вирионов к клеткам-хозяевам. Ранее было показано, что протеолитически отщепляемый от белка S вируса трансмиссивного гастроэнтерита свиней (TGEV) фрагмент массой 26 кДа содержит два соседних антигенных участка — A и B, каждый из которых определяется высокотитровыми нейтрализующими антителами. Для локализации функционально важных детерминант в первичной структуре белка S использовали рекомбинантные бакуловирусы, экспрессирующие C-концевые делеционные варианты 26-килодальтонной области. Два перекрывающихся продукта длиной 223 и 150 аминокислот, имеющие общий N-концевой остаток серина 506, экспрессировали все эпитопы участков A и B и индуцировали образование антител, связывающих вирус. Совместная экспрессия одного из этих усечённых производных белка S с аминопептидазой N (APN) — поверхностной молекулой клетки, выступающей рецептором TGEV, — приводила к образованию комплекса, который можно было иммунопреципитировать с помощью антител к белку S. Эти данные свидетельствуют о том, что основные детерминанты, опосредующие нейтрализацию и связывание с рецептором, расположены в пределах одного домена белка S, функционирующего как независимый модуль. Несмотря на способность предотвращать взаимодействие S–APN, нейтрализующие антитела, по-видимому, распознавали уже сформированный комплекс, что указывает на принципиальное различие детерминант связывания антител и рецептора. В совокупности эти результаты дают новые сведения о молекулярном механизме нейтрализации TGEV.