Сероконверсия SARS-CoV-2 у человека: подробный протокол серологического анализа, получения антигена и постановки теста

SARS‐CoV‐2 Seroconversion in Humans: A Detailed Protocol for a Serological Assay, Antigen Production, and Test Setup
Jessica Tan, Florian Krammer, Viviana Simon, Fatima Amanat, Veronika Chromikova, Philip Meade, Daniel Stadlbauer, Shirin Strohmeier, Ericka Kirkpatrick, Meagan McMahon, Kaijun Jiang, Guha Asthagiri Arunkumar, Disha Bhavsar, Christina Capuano, Ruhi Nichalle Brito, Su Hui Catherine Teo
2020-04-17

сероконверсия SARS-CoV-2трансфекция клеток млекопитающихочистка белкасерологический ИФАантигены спайкового белка
В конце 2019 года в Китае были выявлены случаи атипичной пневмонии. Этиологический агент был быстро идентифицирован как бетакоронавирус, получивший название SARS-CoV-2 и впоследствии вызвавший пандемию. Были разработаны несколько методов специфического обнаружения вирусных нуклеиновых кислот, однако они позволяют выявлять вирус лишь в течение короткого периода времени, как правило во время острой инфекции. Для проведения сероэпидемиологических исследований, изучения антительного ответа на вирус и выявления лиц, потенциально обладающих иммунитетом к повторному заражению, срочно необходимы серологические тесты. В настоящей работе представлен подробный протокол экспрессии антигенов, полученных из спайкового белка SARS-CoV-2 и пригодных для использования в иммунологических анализах, а также двухэтапный серологический иммуноферментный анализ (ELISA). Эти методы могут применяться в научных исследованиях и для тестирования в клинических лабораториях. © 2020 Авторы. Основной протокол 1: трансфекция клеток млекопитающих и очистка белка. Основной протокол 2: двухэтапный ELISA для высокопроизводительного скрининга образцов сыворотки крови человека на наличие антител, связывающихся со спайковым белком SARS-CoV-2.
1
Разработан двухэтапный ИФА для высокопроизводительного выявления в сыворотке человека антител, связывающих шиповидный белок SARS-CoV-2.
2
Методы предназначены для серологических обследований, изучения антительного ответа и выявления лиц, потенциально иммунных к повторному заражению.
3
Описанные серологические анализы компенсируют ограниченное окно обнаружения нуклеиновых кислот, выявляя антительный ответ после инфекции.
4
Протокол рассчитан как на исследовательское применение, так и на тестирование в клинических лабораториях.
5
Протокол описывает экспрессию и очистку антигенов, полученных из шиповидного белка SARS-CoV-2, в клетках млекопитающих для серологических анализов.

Антительные ответы человека на антигены спайкового белка SARS-CoV-2 в сыворотке

Сероконверсия и выявление антител, связывающих спайковый белок, с помощью двухэтапного ELISA

Publication Details
Publication Date
2020-04-17
Journal
Publisher
ISSN
Access Type
Author Information
Authors
Jessica Tan
Florian Krammer
Viviana Simon
Fatima Amanat
Veronika Chromikova
Philip Meade
Daniel Stadlbauer
Shirin Strohmeier
Ericka Kirkpatrick
Meagan McMahon
Kaijun Jiang
Guha Asthagiri Arunkumar
Disha Bhavsar
Christina Capuano
Ruhi Nichalle Brito
Su Hui Catherine Teo
Explore further
Open the scid.ai AI chat with a ready-made request: it will find papers on a similar topic and help build a literature review.
Find similar papers in the chat
Make a presentation
100%