Комбинация человеческих моноклональных антител против коронавируса SARS: синергия и охват мутантов, избегающих нейтрализации

ВВЕДЕНИЕ: Экспериментальные данные, полученные на животных, показывают, что защита от инфекции, вызванной коронавирусом тяжёлого острого респираторного синдрома (SARS-CoV), с помощью человеческих моноклональных антител (mAb) возможна. Для эффективной иммунной профилактики у человека необходимы широкий охват различных штаммов SARS-CoV и контроль потенциальных вариантов, избегающих нейтрализации. Комбинации не конкурирующих между собой mAb, нейтрализующих вирус, могут обладать такими свойствами. МЕТОДЫ И РЕЗУЛЬТАТЫ: Было показано, что человеческое mAb CR3014 полностью предотвращает патологические изменения в лёгких и прекращает выделение SARS-CoV из глотки у инфицированных хорьков. В условиях in vitro мы получили варианты SARS-CoV, избегающие нейтрализации CR3014; все они имели единственную мутацию P462L в гликопротеиновом шипе (S) вируса, избегающего нейтрализации. Эксперименты in vitro подтвердили, что связывание CR3014 с рекомбинантным фрагментом S (аминокислотные остатки 318–510), содержащим эту мутацию, отсутствовало. Поэтому мы провели скрининг библиотеки антитело-фаг, созданной на основе крови пациента, перенёсшего SARS, для поиска антител, комплементарных CR3014. Было идентифицировано новое mAb CR3022, которое нейтрализовало вирусы, избегающие нейтрализации CR3014, не конкурировало с CR3014 за связывание с рекомбинантными фрагментами S1 и связывалось с фрагментами S1, происходящими от SARS-CoV-подобного штамма SZ3, выделенного у пальмовой циветты. С помощью CR3022 не удалось получить варианты, избегающие нейтрализации. Смесь обоих mAb обеспечивала синергическое нейтрализующее действие против SARS-CoV за счёт распознавания различных эпитопов в рецептор-связывающем домене. При 100% нейтрализации индексы снижения дозы для CR3014 и CR3022 составляли соответственно 4,5 и 20,5. Поскольку усиление инфекции SARS-CoV субнейтрализующими концентрациями антител вызывает обеспокоенность, мы показали, что антитела против SARS-CoV не превращают абортивную инфекцию первичных макрофагов человека, вызванную SARS-CoV, в продуктивную. ВЫВОДЫ: Комбинация двух не конкурирующих между собой человеческих mAb CR3014 и CR3022 потенциально контролирует иммунное ускользание и расширяет широту защиты. В то же время…