Разработка непрямого ИФА на основе белка-шипа для выявления антител к коронавирусу кошек

Коронавирус кошек (FCoV) — патогенный вирус, широко распространённый среди кошек; он вызывает доброкачественное энтерическое заболевание и смертельную системную болезнь — инфекционный перитонит кошек. Разработка серологических диагностических инструментов для FCoV полезна для клинической диагностики и эпидемиологических исследований. Поэтому целью настоящего исследования была разработка непрямого иммуноферментного анализа (iELISA) для выявления антител к FCoV с использованием рекомбинантного белка-шипа с гистидиновой меткой. Белок S FCoV (1127–1400 аминокислот) экспрессировали и использовали в качестве антигена для постановки ИФА. У мышей и кроликов, иммунизированных этим белком, вырабатывались антитела, которые распознавали и связывались с белком. Коэффициент вариации (CV) внутри серии составлял 1,15–5,04%, а коэффициент вариации между сериями — 4,28–15,13%, что свидетельствует о приемлемой воспроизводимости метода. iELISA не давал перекрёстной реакции с антисыворотками к другим вирусам кошек. Анализ ROC-кривой показал чувствительность iELISA 86,7% и специфичность 93,3%. На наличие антител к FCoV были исследованы образцы сыворотки (n = 107); в 70,09% образцов были обнаружены антитела к FCoV. Разработанный в настоящем исследовании iELISA может применяться для определения сывороточных антител к FCoV благодаря приемлемым показателям воспроизводимости, чувствительности и специфичности. Кроме того, данные анализа полевых образцов продемонстрировали высокую распространённость FCoV среди популяций кошек в провинции Фуцзянь, Китай.